Piattaforma di Imaging e Microscopia NICO
La rapida evoluzione delle tecnologie di microscopia, insieme alla crescente complessità della preparazione dei campioni e dell’analisi dei dati, rende essenziale la centralizzazione delle competenze e delle strumentazioni in un’unica risorsa accessibile. La Piattaforma di Imaging e Microscopia è stata istituita proprio per rispondere a queste esigenze, offrendo alla comunità scientifica un centro altamente specializzato con tecnologie avanzate per applicazioni morfologiche, funzionali, quantitative e tridimensionali.
La facility ospita sistemi all’avanguardia che includono microscopia elettronica a scansione e a trasmissione, confocale ad alta risoluzione, microscopia due-fotoni, microscopia a foglietto di luce e widefield, oltre a piattaforme per lo slide scanning digitale e la ricostruzione morfometrica avanzata. L’integrazione di queste modalità complementari permette ai ricercatori di affrontare un’ampia gamma di esigenze sperimentali — dall’ultrastruttura subcellulare all’imaging 3D di organi interi.
Inoltre, la piattaforma mette a disposizione postazioni di lavoro dedicate all’elaborazione dei dati, alla ricostruzione 3D, all’analisi statistica e alla morfometria quantitativa, supportate da software specializzati per le neuroscienze, la biologia cellulare e gli studi anatomici. Sistemi di live-cell imaging in tempo reale, strumenti di microscopia quantitativa e piattaforme ad alta produttività ampliano ulteriormente le capacità della facility, creando un ambiente completo per la ricerca multidisciplinare e la formazione tecnica avanzata.
Strumenti
Microscopio Elettronico a Scansione (SEM)
Zeiss Gemini 460
- Modulo STEM
- Rivelatore Volume BSE ad alta risoluzione
- Sistema Zeiss “Volutome” per il taglio seriale automatico e l’imaging, con compensatore CC focale
Microscopio Elettronico a Trasmissione (TEM)
JEOL JEM-1010
- Sorgente elettronica a filamento di tungsteno
- Tensione di accelerazione: 40–100 kV
- Ingrandimento: 600×–500.000×
Microscopio Confocale
Zeiss LSM 980 con Airyscan 2
- Microscopio invertito Axio Observer 7 completamente motorizzato (passo Z di 10 nm)
- AI Sample Finder, Definite Focus 3
- Obiettivi: 2.5×, 10×, 20×, 25× multi-immersione, 40× olio, 63× olio
- Illuminazione: LED Colibri 7 (385–630 nm), filtri DAPI/GFP/Cy3/Cy5
- Rivelatori: 2 PMT raffreddati, 4 GaAsP, array Airyscan 2 (32 canali)
- Risoluzione: fino a 90 nm xy / 270 nm z
- Modalità multiplex: 2–8 voxel, fino a 47.5 fps @512×512
- Laser: 405, 488, 543, 639 nm (rilevazione 385–900 nm)
- Applicazioni: imaging 3D, cellule vive, time-lapse
- Software: ZEN Blue (spectralunmixing, rendering 3D, colocalizzazione, stitching, analisi AI)
- Workstation: HP Z6, Intel Xeon Gold, 32 GB RAM (espandibili), NVIDIA Quadro RTX4000, monitor 32″ 4K
Microscopia a Due Fotoni
Nikon A1RMP High-Speed Multi-Photon Microscope
- Tavolino motorizzato per imaging in vivo, ex vivo, in vitro
- Sistema di scansione galvanometrico e risonante
- Laser infrarossoTi:Sapphire a impulsi femtosecondi, regolabile 700–1080 nm
- Obiettivi:
- CFI60 Planfluor 10× NA 0.3 (16 mm)
- CFI75 LWD 16×W NIR NA 0.80 (3 mm)
- CFI75 LWD Apo 25×W NA 1.0 (2 mm)
- CFI60 Apo 40×W NIR NA 0.80 (3.5 mm)
- Rivelatore: 4 canali GaAsP NDD ad alta sensibilità
Microscopia a foglietto di luce
Miltenyidiote Ultra Microscope II
- Microscopio a foglietto di luce a fluorescenza per imaging 3D su larga scala
- Dimensioni campione: fino a ~1 cm (organoidi, embrioni di topo, cervello, organi, tumori, sezioni tissutali)
- Obiettivi: Zoom 2× NA 0.5; Super Plan 1.1× NA 0.1, 4× NA 0.35, 12× NA 0.53
- Ingrandimenti: 1.26×–12.6× (Zoom), 0.66×–30× (Super Plan)
- Sorgenti luminose: laser a 5 linee (405, 488, 561, 639, 785 nm) o super continuum (460–800 nm)
- Rivelatore: videocamera sCMOS (5.5 MP, 60% QE o 4.2 MP, 82% QE, fino a 100 fps)
- Applicazioni: imaging di organi interi, rilevamento a singola cellula, mappatura 3D di reti, LSFM time-lapse
Microscopia widefield
ZEISS Apotome 3 / Axio Imager Z2
- Illuminatore: Colibri 7 FR-R[G/Y]BV-UV
- Camere: Axiocam 705 mono R2, Axiocam 305 color R2
- Obiettivi: 5×, 10×, 20×, 40×, 63×
- Filtri: DAPI, GFP, Cy3, Cy5
- Workstation: ZEISS 60A R2 (HP Z6)
Slide Scanning
Zeiss Axioscan Z.1
- Illuminatore: Colibri 7, R[G/Y]CBV-UV
- Camere: Hitachi HV-F203, Orca Flash 4.0 V3
- Obiettivi: 5×, 10×, 20×, 40×, 63×
- Filtri: 38 HE eGFP, 43 HE Cy3, 56/90/91/92 HE LED, 108 HE LED
- Capacità vetrini: 25×4, 5×2, 1×1
- Workstation: ZEISS 55A R2 & 60A R2, Intel Xeon, grafica NVIDIA Quadro
Sistemi Neurolucida
NL Workstation 1
- Nikon Eclipse E600, tavolino motorizzato
- Camera: Microfire 2 MP Colore (1600×1200)
- Obiettivi: 2×, 4×, 10×, 20×, 40×, 100×
- Filtri: DAPI, Verde (Cy2/Alexa488), Rosso (Cy3/Alexa546)
- Software: Neurolucida, Neurolucida Explorer, Stereoinvestigator
NL Workstation 2
- Nikon Eclipse 80i, tavolino motorizzato
- Camere: CCD 3/4″ 1.92 MP, Microfire 2 MP
- Obiettivi: 4×, 10×, 20×, 40×, 60×, 100×
- Filtri: DAPI, Verde(Cy2/Alexa488), Rosso(Cy3/Alexa546), Rosso Profondo (Cy5/Alexa647)
- Software: Neurolucida, Neurolucida Explorer
Microscopi Specializzati
Sartorius IncuCyte S3
- Misurazioni automatizzate in tempo reale di cellule vive, direttamente in incubatore (ambiente non perturbante)
- Imaging a lungo termine: da ore a giorni
- Obiettivi: 4×, 10×, 20× (torretta automatizzata)
- Modalità di imaging: contrasto di fase HD, fluorescenza rossa e verde
- Formati saggi: piastre da 96 e 384 pozzetti (fino a 6 contemporaneamente)
